أقيمت في كلية طب الأسنان ندوة علمية بعنوان (Application and advantages of chromogenic in situ hybridization (CISH) technology)، (تطبيقات وفوائد تقنية اللونية في موقع التهجين)، قدمها الدكتور (عمار عيسى مهدي) حضرها عميد الكلية الدكتور (مهدي يعكَوب كزار) ومعاون العميد للشؤون العلمية الدكتورة (لمياء عبد الخالق) بالإضافة الى عدد من تدريسي الكلية , حيث تحدث بداية الندوة عن التقنية اللونية على انها تقنية وراثية خلوية تجمع بين طريقة الكشف عن إشارة الكروموسومات في تقنيات المناعية IHC مع CISH , والذي تم تطويره في عام 2000 كبديل للتوهج في الموقع الفلوري FISH للكشف عن تضخم الجين الورمي أذ` يتشابه CISH مع FISH لتقنيات تهجين في الموقع تستخدم للكشف عن وجود أو عدم وجود مناطق محددة من الحمض النووي , ومع ذلك فانCISH هو أكثر عملية في المختبرات التشخيصية لأنه يستخدم المجاهر الضوئية بدلا من المجاهر الفلورسنت التي تعد أكثر تكلفة وتعقيدا.
يتشابه تصميم الفحص الخاص بـ CISH مع التصميم الخاص بـ FISH مع وجود اختلافات فقط في وضع العلامات والكشف, عموما يتم وصف المسابر FISH مع مجموعة متنوعة من علامات الفلورسنت المختلفة ويمكن اكتشافها فقط تحت مجهر الفلورسنت، في حين يتم وصف المسابر CISH مع البيوتين biotin أوdigoxigenin ويمكن الكشف عنها باستخدام مجهر الضوئي. المسابر CISH هي حوالي 20 نيكلوتيدات في الطول ومصممة لأهداف الحمض النووي. وهي مكملة للتسلسل المستهدف وترتبط به بعد خطوة التشتيت والتهجين فقط عدد قليل من المسابر CISH متوفرة تجاريا.
يعتبر FISH المعيار الذهبي للكشف عن تشوهات الكروموسومات لأنها حساسة للغاية وذات دقة عالية , عادة ما تقارن التقنيات الأخرى التي تم تطويرها لاكتشاف التشوهات الصبغية بحساسية ونوعية FISH لمعرفة كيفية قياسها , على سبيل المثال بالمقارنة مع FISH أظهر CISH أن لديه حساسية بنسبة 97.5? وخصوصية 94? للكشف عن تضخم الجين HER-2 / neu حيث معدل التوافق بين FISH و CISH هو %94.8 ، مما يدل على CISH لتكون تقنية مشابهة لطريقة FISH حيث معظم المصادر الأخرى توافق وتعلن عن أداء متساو تقريبا في فحوصات تضخيم الجينات لـ FISH و CISH ومع ذلك ، في بعض الأحيان يظهر CISH حساسية أقل لتضخيم المستوى المنخفض.
CISH له بعض المزايا على FISH في الكواشف والمعدات التي تستخدمها ، فإن CISH أرخص بكثير ويمكن استخدامه بسهولة لأنه يستخدم مجاهر الضوئية بدلاً من مجاهر الفلورنست بالإضافة إلى ذلك ، تكون كواشف CISH أكثر استقرارًا من كواشف FISH لذا من الممكن تخزين العينات وفحص العينة نفسها عدة مرات. تتلاشى الكواشف FISH مع مرور الوقت بسبب photo-bleaching بحيث يمكن فحص العينة مرة واحدة فقط. وبصرف النظر عن مجهر الفلورنست باهظة الثمن أذ يتطلب FISH كاميرا رقمية عالية الدقة لالتقاط micrographs من العينة قبل أن يتلاشى , يتم تطبيق CISH بشكل متكرر لتقييم تضخيم الجينات مثل حالة HER-2 / neu في عينات سرطان الثدي. ويرتبط تضخم HER-2 / neu بارتفاع معدل الوفيات ومعدل تكرار أعلى وسوء التكهن في سرطان الثدي إن الجسم المضاد وحيد النسيلة ( trastuzumab) هو مانع مستقبلات ثبت أنه فعال من الناحية السريرية في أورام من الأهمية بمكان تحديد حالة المستقبل قبل بدء علاج السرطان.
كما يستخدم CISH للكشف عن إعادة ترتيب الكروموسومات والاندماج مثل اندماج انزيم ALK tyrosine kinase مع المروج ومنطقة 5 من EML4 في سرطان الرئة الأورام الموجبة ALK هي مجموعة فرعية ذات صلة سريريًا حيث يمكن علاجها بشكل فعال للغاية باستخدام مثبط ALK crizotinib) )، وقد تبين أيضا أن CISH مفيدة في الكشف عن عدوى فيروس الورم الحليمي البشري. فيما خرجت الندوة بتوصيات منها يمكن استخدام الطريقة اللونية في موقع التهجين CISH بسهولة في اختبار روتيني في مختبرات المستشفيات وهو ملحق ضروري في تحديد المرضى الذين لديهم تضخيم المرتبط بجين HER/NEU إيجابي لمريضات أورام سرطان الثدي التي يمكن ان يستفيدن من العلاج trastuzumab كما يمكن ان يستخدم الطريقة اللونية في موقع CISH في تشخيص كلا من الاورام والفايروسات على حد سواء. بالاضافة الى استخدام الطريقة اللونية في موقع CISH بدل عن تحليل التوهج في الموقع الفلوري FISHفي تشخيص هذه الحلات المرضية .
|
|
|
 |
بقلم فرات حسين حسن - الإعلام
|